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    PCR在臨床中的運用(一)

    發(fā)布時間: 2009-07-28  點擊次數(shù): 3035次

    PCR技術(shù)結(jié)核菌檢測中的應(yīng)用

     結(jié)核菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在:1. 區(qū)分TB與其它分枝桿菌;2. 檢測TB耐藥基因;3. 提高TB的陽性檢出率。

     PCR技術(shù)在HBV檢測中的應(yīng)用

    1、 了解乙肝病毒在體內(nèi)存在的數(shù)量。
    2、 是否傳染,傳染性有多強。
    3、 是否復(fù)制。
    4、 是否有必要服藥。
    5、 肝功能異常改變是否由病毒引起。
    6、 判斷病人是適合用哪類抗病毒藥物。
    7、 判斷藥物治療的療效。

     PCR技術(shù)在HCV檢測中的應(yīng)用

    HCV是引起輸血后肝炎的主要致病因子,因其在血中的含量極低,僅為HBV的1%,其免疫學標志只有抗-HCV一項,且至今病毒分離尚未成功,所以HCV的檢測較HBV困難的多,因此,PCR技術(shù)在HCV的檢測出顯得格外重要,其意義主要表現(xiàn)在:
    1、抗-HCV可作為HCV感染診斷的指標。由于個體間免疫功能的差異,部分患者出現(xiàn)抗-HCV較晚,免疫功能低下者和經(jīng)免疫抑制治療者甚至可能不產(chǎn)生抗-HCV;因此HCV-RNA是HCV感染的確診標志。據(jù)報道,在患者發(fā)病30-60天和6-30個ELISA抗-HCV的檢出率分別為45%和67%,說明ELISA檢出抗-HCV有相當高的漏檢率。
    2、在“窗口期”沒有抗-HCV產(chǎn)生,但可檢測出RNA。
    3、HCV-RNA定量可指導(dǎo)用藥,為療效觀察及預(yù)后判斷提供客觀指標。血清HCV拷貝高對干擾素不敏感,低敏感,據(jù)報道,HCV<100pg/ml組:11/30轉(zhuǎn)陰HCV>100pg/ml組:1/30轉(zhuǎn)陰。
    HCV-RNA持續(xù)維持高水平狀態(tài)可能預(yù)后不佳。
    4、抗-HCV陽性并不能代表現(xiàn)癥感染,丙型肝炎的診斷標準是HCV-RNA(+).

     PCR在CT檢測中的應(yīng)用
     
    CT是非淋菌性尿道炎的主要病原微生物之一,有時還可引起不育等其它疾病。CT為專性細胞寄生性,一般培養(yǎng)不能生長,只有在活細胞內(nèi)才能增殖復(fù)制,實驗室通過Mcloy、Hela-229細胞培養(yǎng)觀察包涵體,可認為是診斷“金標法”。但因操作復(fù)雜,技術(shù)要求高,需時間長,并不適于臨床檢測。免疫學方法有直接免疫熒光法、EIA法等,但這兩種方法無論是檢測抗原還是抗體陽性率均不足50%,用單抗會丟失位點、多抗有交叉反應(yīng),在高危人群篩查中常與金葡萄球菌、鏈球菌、淋球菌等發(fā)生交叉反應(yīng)使其特異性受到影響,因此,國內(nèi)外專家一致認為CT的基因診斷方法應(yīng)定為“金標準”。
     


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